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小鼠破骨細(xì)胞的使用方法和注意事項(xiàng)

更新時間:2021-08-25點(diǎn)擊次數(shù):1573
  小鼠破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞,位于骨組織表面的淺凹處,破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng),其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。
       破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化,是一種終末分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時間較短。
  小鼠破骨細(xì)胞分離自骨組織和骨髓;破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞,位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng),其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化,因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機(jī)制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時間較短。
  一、使用方法:
  1、小鼠破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時間較短;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),此細(xì)胞不建議傳代。取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
  2、細(xì)胞消化
  1) 吸出細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
  2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化;
  3) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
  4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
  二、注意事項(xiàng):
  1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
  2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
  3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
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